Fundamentos dos Testes Clínicos - Princípios deAnalisadores de Hematologia
Princípio da detecção elétrica
1. Método de Impedância Elétrica — Princípio clássico de Coulter
Quando o tampão isotônico é injetado e a corrente direta de baixa frequência é aplicada, os eletrodos internos e externos e o buffer formam um loop de corrente. Quando a suspensão celular é sugada através do orifício de contagem de gemas no pequeno tubo de orifício por pressão negativa, devido às características relativamente não condutoras das células sanguíneas, a resistência na área de indução do pequeno orifício no circuito aumenta repentinamente, causando alterações instantâneas de tensão para formar pulsos Sinal.
A força do sinal de pulso reflete o tamanho do volume celular, e a quantidade do sinal de pulso reflete o número de células.
Esses sinais de pulso passam por amplificação, ajuste de limiar, triagem, modelagem, contagem e sistema de proteção automática de controle para completar a contagem e a determinação do volume das células sanguíneas.
Analisadores de sangue de três classesusam principalmente o princípio da impedância elétrica.
2. Método condutor de radiofrequência
A corrente de alta frequência pode passar pela membrana celular. Devido às diferentes estruturas internas de diferentes células, a condutividade elétrica também é diferente. Portanto, sondas eletromagnéticas de alta frequência são usadas para detectar a condutividade elétrica das células. A classificação celular é realizada utilizando informações características como composição (tamanho, densidade).
Princípio da Detecção Óptica
1. Dispersão de luz por dispersão a laser
A suspensão celular após ser diluída, tingida, etc. é injetada no centro do fluido da baia, e as células são dispostas de forma limpa e cantada ao longo dos dois fluxos da suspensão e do fluido da baia, e passam pela área de detecção a uma taxa de fluxo constante.
Quando as células são irradiadas pelo raio laser na área de detecção, elas podem bloquear ou alterar a direção do raio laser devido às suas próprias características (como volume, grau de coloração, tamanho e número de conteúdo celular, densidade do núcleo, etc.), resultando em vários ângulos correspondentes às suas características. O sinal de luz dispersa pode ser recebido por monitores de sinal em diferentes ângulos:
(1) A luz dispersa de baixo ângulo, também conhecida como luz dispersa de ângulo avançado, reflete o número e o volume da superfície das células (ou partículas)
(2) A luz dispersa de alto ângulo, também conhecida como luz dispersa de ângulo lateral, reflete a complexidade de partículas e núcleos dentro das células
Técnicas de luz dispersa podem detectar células manchadas, incluindo corantes fluorescentes e não fluorescentes. Diferentes tipos de células são manchadas com corantes em diferentes graus, e a fluorescência dispersa resultante e as mudanças de luz dispersas também são diferentes, de modo que tipos normais de células (ou partículas) podem ser precisamente distinguidos.
2. Espectrofotometria
Usado principalmente para a determinação da hemoglobina.
Siga a lei Lambert-Beer.
